Presentación

El Laboratorio de Pruebas Biológicas del Instituto de Química de la UNAM proporciona  servicio de apoyo a la investigación  con los diversos métodos de prueba que tiene estandarizados. El servicio está disponible para usuarios internos de la UNAM y para  externos.  El laboratorio cuenta con el equipo y personal capacitado que permite ofrecer un servicio de calidad en la obtención de los resultados. La M. en C. Ma. Teresa Ramírez Apan y  el M. en C. Antonio Nieto Camacho son los Técnicos Académicos responsables de realizar los bioensayos y de apoyar al usuario del servicio en los aspectos estadísticos y de interpretación de resultados.

El laboratorio se ubica en el edificio B del Instituto de Química en el campus de Ciudad Universitaria de la UNAM.

  • Equipo disponible e infraestructura

  • Lector de Placas SYNERGY HT, BioTek
  • Lavador de placas ELx405, BioTek
  • Campana de Flujo Laminar, ESCO
  • Incubadora de CO2, ESCO
  • Contador automatizado de células TC20, BIO-RAD
  • Centrífuga clínica 228, Fisher Scientific
  • Centrífuga refrigerada 5415R, Eppendorf
  • Balanza analítica BP61S, Sartorius
  • Microscopio óptico invertido DIAPHOT 300, Nikon
  • Potenciómetro 50 pH Meter, Beckman
  • Ultracongelador Ultima II, REVCO
  • Autoclave vertical, Boyer
  • El laboratorio cuenta con un bioterio  para realizar las pruebas in vivo.

 

Servicios que ofrece

  • Actividad citotóxica en líneas celulares cancerosas de humano siguiendo el protocolo de Sulforrodamina B descrito por el Instituto Nacional del Cáncer de los Estados Unidos de Norteamérica.
  • Viabilidad celular en cultivos celulares de cáncer humano y células sanas de acuerdo al protocolo de la ruptura de la sal de tetrazolio (MTT).
  • Toxicidad aguda en Artemia salina.
  • Actividad antiinflamatoria de compuestos de naturaleza esteroidal y no esteroidal mediante los siguientes modelos:
    • Edema inducido con la aplicación tópica de 13-acetato de 12-O-Tetradecanoil-forbol (TPA) en la oreja de ratón
    • Cuantificación del contenido de la enzima mieloperoxidasa en biopsias de oreja de ratón inflamada.
    • Edema inducido con inyección de carragenina en la pata de ratón y rata.
  • Evaluación de actividad analgésica con los modelos de modelo de platina caliente (Hot-plate) y contracción abdominal inducida con ácido acético en ratón (Writhuing).
  • Actividad antioxidante:
    • Cuantificación de  la reducción del radical libre 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH)
    • Inhibición de la peroxidación de lípidos inducida con FeSO4 o AAPH en homogeneizado de cerebro de rata.
  • Inhibición de la enzima alfa glucosidasa de levadura y de intestino de rata
  • Toxicidad oral aguda con base en el protocolo de la OECD

Las pruebas que se realizan en dos etapas: cernimiento  primario (una sola concentración) y curvas concentración - respuesta (4 a 6 concentraciones). Para las curvas concentración - respuesta es necesario hacer entre tres y cinco experimentos independientes para obtener la Concentración Inhibitoria 50 (CI50) ± ESM (error estándar de la media).

Para las muestras externas (STE, STA) que se someten a cernimiento primario el tiempo de entrega de resultados es de 3 a 4 semanas, debido a que se hacen al menos tres experimentos independientes para reportar la reproducibilidad de actividad de la muestra (Promedio ± ESM).

Para las muestras que se someten a curvas concentración - respuesta el Investigador deberá ser informado vía telefónica o por correo electrónico que los resultados finales de la IC50 se tendrán de 1 a 3 meses dependiendo del número de líneas celulares que se sometan para la IC50 y de la cantidad de muestras en espera.

 

Requisitos de la muestra para su análisis

Con el objetivo de proporcionar un servicio satisfactorio se le solicita al usuario que sus muestras cumplan con los siguientes requisitos:

  • Para cernimiento primario se requiere entre 1 a 2 mg de muestra
  • Para la curva de concentración-respuesta que requieren 20 mg de la muestra
  • La solubilidad debe ser mayor o igual a 20 mg/mL para extractos o fracciones y de  20 mM para compuestos puros.
  • Para los experimentos de citotoxicidad la muestra debe ser soluble exclusivamente en dimetilsulfóxido, etanol, metanol o agua.
  • Para las demás pruebas la muestra deben ser completamente soluble en alguno de los siguientes disolventes:  metanol, etanol, acetona, cloroformo,  dimetilsulfóxido o agua.
  • El usuario es el responsable de pesar correctamente de la muestra y de la pureza de la misma. Para curvas concentración-respuesta la muestra debe ser del mismo lote con el que se solicitó el cernimiento.

 

Tiempo de entrega de resultados

  • Actividad citotóxica y viabilidad celular
    • Ensayo de cernimiento: 15 días hábiles
    • Curvas concentración respuesta:  1 a 3 meses
  • Las demás pruebas tienen un periodo de entrega entre 5 a 25 días hábiles
  • Los tiempos de entrega son en condiciones normales de trabajo y pueden variar dependiendo de la carga de trabajo del laboratorio
  • Los resultados se entregaran en formato impreso o electrónico.

 

 Comité Interno para el cuidado y uso de animales de laboratorio (CICUAL).

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