Laboratorio de Pruebas Biológicas
(PB)
El Laboratorio de Pruebas Biológicas del Instituto de Química de la UNAM proporciona servicio de apoyo a la investigación con los diversos métodos de prueba que tiene estandarizados. El servicio está disponible para usuarios internos de la UNAM y para externos. El laboratorio cuenta con el equipo y personal capacitado que permite ofrecer un servicio de calidad en la obtención de los resultados. La M. en C. Ma. Teresa Ramírez Apan y el M. en C. Antonio Nieto Camacho son los Técnicos Académicos responsables de realizar los bioensayos y de apoyar al usuario del servicio en los aspectos estadísticos y de interpretación de resultados.
Nota
Formato de resultados
- Lector de Placas SYNERGY HT, BioTek. 
- Lavador de placas ELx405, BioTek. 
- Campana de Flujo Laminar, ESCO. 
- Incubadora de CO2, ESCO. 
- Contador automatizado de células TC20, BIO-RAD. 
- Centrífuga clínica 228, Fisher Scientific. 
- Centrífuga refrigerada 5415R, Eppendorf. 
- Balanza analítica BP61S, Sartorius. 
- Microscopio óptico invertido DIAPHOT 300, Nikon. 
- Potenciómetro 50 pH Meter, Beckman. 
- Ultracongelador Ultima II, REVCO. 
- Autoclave vertical, Boyer. 
- El laboratorio cuenta con un bioterio para realizar las pruebas in vivo. 
- Evaluar la inhibición del crecimiento de líneas de cáncer humano en cultivo. 
- Evaluar la capacidad de antioxidante de sustancias puras o mezclas. 
- Determinación de la actividad antiinflamatoria de extractos vegetales y compuestos químicos orgánicos e inorgánicos. 
- Todos los análisis que realiza el laboratorio son de tipo cuantitativo, para trámites ante instancias gubernamentales y cumplir con los requisitos. 
- Determinación de la toxicidad aguda en ratones y crustáceos de compuestos y extractos. 
- Actividad citotóxica en líneas celulares cancerosas de humano siguiendo el protocolo de Sulforrodamina B descrito por el Instituto Nacional del Cáncer de los Estados Unidos de Norteamérica. 
- Viabilidad celular en cultivos celulares de cáncer humano y células sanas de acuerdo al protocolo de la ruptura de la sal de tetrazolio (MTT). 
- Toxicidad aguda en Artemia salina. 
- Actividad antiinflamatoria de compuestos de naturaleza esteroidal y no esteroidal mediante los siguientes modelos: 
- Edema inducido con la aplicación tópica de 13-acetato de 12-O-Tetradecanoil-forbol (TPA) en la oreja de ratón. 
- Cuantificación del contenido de la enzima mieloperoxidasa en biopsias de oreja de ratón inflamada. 
- Actividad analgésica en el modelo de Contracción abdominal inducida con ácido acético en ratón (Writhing). 
- Actividad antioxidante: 
- Cuantificación de la reducción del radical libre 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH). 
- Inhibición de la peroxidación de lípidos inducida con FeSO4 o AAPH en homogeneizado de cerebro de rata. 
- Inhibición de la enzima alfa glucosidasa de levadura y de intestino de rata. 
- Inhibición de la enzima aceltilcolinesterasa de anguíla eléctrica y humana. 
- Toxicidad oral aguda con base en el protocolo de la OECD. 
- Las pruebas que se realizan en dos etapas: cernimiento primario (una sola concentración) y curvas concentración – respuesta (4 a 6 concentraciones). Para las curvas concentración – respuesta es necesario hacer entre tres y cinco experimentos independientes para obtener la Concentración Inhibitoria 50 (CI50) ± ESM (error estándar de la media). 
- Para las muestras externas (STE, STA) que se someten a cernimiento primario el tiempo de entrega de resultados es de 3 a 4 semanas, debido a que se hacen al menos tres experimentos independientes para reportar la reproducibilidad de actividad de la muestra (Promedio ± ESM). 
- Para las muestras que se someten a curvas concentración – respuesta el Investigador deberá ser informado vía telefónica o por correo electrónico que los resultados finales de la IC50 se tendrán de 1 a 3 meses dependiendo del número de líneas celulares que se sometan para la IC50 y de la cantidad de muestras en espera. 
Con el objetivo de proporcionar un servicio satisfactorio se le solicita al usuario que sus muestras cumplan con los siguientes requisitos:
- Para cernimiento primario se requiere entre 1 a 2 mg de muestra. 
- Para la curva de concentración-respuesta que requieren 20 mg de la muestra 
- La solubilidad debe ser mayor o igual a 20 mg/mL para extractos o fracciones y de 20 mM para compuestos puros. 
- Para los experimentos de citotoxicidad la muestra debe ser soluble exclusivamente en dimetilsulfóxido, etanol, metanol o agua. 
- Para las demás pruebas la muestra deben ser completamente soluble en alguno de los siguientes disolventes: metanol, etanol, acetona, cloroformo, dimetilsulfóxido o agua. 
- El usuario es el responsable de pesar correctamente de la muestra y de la pureza de la misma. Para curvas concentración-respuesta la muestra debe ser del mismo lote con el que se solicitó el cernimiento. 
- El usuario debe garantizar que al pesar una muestra, la incertidumbre de la pesada sea menor o igual al 10%. 
Para los experimentos de citotoxicidad la muestra debe ser soluble exclusivamente en dimetilsulfóxido, etanol, metanol o agua. Para las demás pruebas la muestra deben ser completamente soluble en alguno de los siguientes disolventes: metanol, etanol, acetona, cloroformo, dimetilsulfóxido o agua.
- Actividad citotóxica y viabilidad celular. 
- Ensayo de cernimiento: 15 días hábiles. 
- Curvas concentración respuesta: 1 a 3 meses. 
- Las demás pruebas tienen un periodo de entrega entre 5 a 25 días hábiles. 
- Los tiempos de entrega son en condiciones normales de trabajo y pueden variar dependiendo de la carga de trabajo del laboratorio. 
- El tiempo de promesa de entrega de resultados empieza a correr el día que el usuario entrega los animales al personal de LPB. En el caso de muestras ingresadas por la Secretaria Técnica, ésta proveerá los animales. 
 
 
								 
								 
								 
								